「重要通知」-電轉染小課堂開課啦

重要通知：電轉染小課堂開課啦

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重要的事情說三遍

大家快趕緊關注

從本期開始將分享電轉染方面的知識以及如何優化電轉參數

Part 1 什麼是電轉？

電轉即電穿孔，是一種有效的非病毒介導方法，可以將基因或其他分子高效地導入原核生物或哺乳動物細胞中。通過這種方法導入目的基因可以建立一個瞬時轉染，以此來研究蛋白質表達，或可以導入siRNA來敲除或“沉默”基因，同時也可以通過電轉方法來進行基因靶向和功能研究。

Part 2 電穿孔技術是如何將外源物質導入細胞中的？

電穿孔儀利用直流電脈衝瞬時電擊細胞，增大細胞膜通透性或使細胞膜形成小孔，從而使小分子物質，如染料、寡核苷酸、肽等物質進入細胞。當直流電場去除掉，細胞膜可恢復原來的狀態。

電轉染的方法較化學法、脂質體法、和病毒法具有效率高、費時少、成本低、無細胞毒性等特點，因而被廣泛採用。但是電擊過大會造成細胞死亡，而電擊不足會造成轉染效率低，所以我們在進行電轉染實驗之前，需要對轉染相關參數進行優化，以使轉染效率最大化。

Part 3 如何評估轉染效果？

我們一般用轉染效率和存活率評估轉染實驗的效果。轉染效率可以用β-半乳糖苷酶測定法/氯黴素乙酰轉移酶測定法/綠色熒光蛋白法/流式細胞儀篩選法測定。細胞存活率可以用流式細胞儀篩選法/臺酚藍染色法測定。

轉染效率=轉染的細胞數/活的細胞數

細胞存活率=活的細胞數/總的細胞數

進行電轉染實驗時，增加場強，轉染效率會增加，但是細胞存活率會降低，因此必須優化電參數，以尋求轉染效率和存活率之間的平衡點。

下期預告：電轉染小課堂之如何選擇波形？

自從1938年BTX推出第一臺商用電穿孔儀以來，BTX一直處於電穿孔技術的最前沿，一直致力於為各種細胞和組織類型提供完整的轉染解決方案，包括真核生物，原核生物，體內組織，卵內，子宮內，貼壁和懸浮培養，植物細胞，皮膚和肌肉免疫。除電穿孔儀外，BTX還為各種應用提供和研發專業的電極。北京德泉興業商貿有限公司為BTX在北京和東三省地區的一級代理。歡迎致電聯繫我們。